Trizol使用說明書
大小：183 人氣：12 2010-05-06 需要積分：3
標簽：使用說明書(14288)
一、分離純化的基本原理
研究基因的表達和調控時常常要從組織和細胞中分離和純化RNA。RNA質量的高低常常影響cDNA庫，RT-PCR和Northern Blot等分子生物學實驗的成敗。Trizol是一種新型總RNA抽提試劑，內含異硫氰酸胍等物質，能迅速破碎細胞，抑制細胞釋放出的核酸酶。
二、用戶需自備的試劑和材料
無水乙醇、氯仿、Glycogen（可能需要）、 1.5ml Eppendorf管（RNase-free）、 Tips（RNase-free）
三、準備工作
RNase酶非常穩定，是導致RNA降解最主要的物質。它在一些極端的條件可以暫時失活，但限制因素去除后有迅速復性。用常規的高溫高壓蒸氣滅菌方法和蛋白抑制劑都不能是RNase完全失活。它廣泛存在于人的皮膚上，因此，在與RNA制備有關的分子生物學實驗時，必須戴手套。
RNase的又一污染源是取液器，根據取液器制造商的要求對取液器進行處理。一般情況下采用用DEPC配制的70%乙醇擦洗取液器的內部和外部，基本達到要求。取RNase-free的物品時必須戴手套。
1、 料制品的處理 盡可能使用無菌，一次性塑料制品，已標明RNase-Free 的塑料制品，如沒有開封使用過通常沒有必要再次處理。對于國產塑料制品，原則上都必須處理方可使用。處理步驟如下：
1）在玻璃燒杯中注入去離子水，加入DEPC使DEPC的終濃度為0.1%。注意：DEPC為劇毒物，活性很強，小心在通風柜中使用。
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